顯微計數(shù)法不溶性微粒儀基于光學(xué)顯微鏡原理，結(jié)合精密的圖像分析技術(shù)。當(dāng)含有不溶性微粒的樣品被置于儀器的載物臺上，通過特定的取樣裝置，將一定體積的樣品抽取并均勻鋪展在特制的計數(shù)池中。計數(shù)池通常具有準(zhǔn)確的厚度，以便控制樣品的液層深度，確保微粒在焦平面內(nèi)清晰成像。
 

　　儀器的光學(xué)系統(tǒng)包含高倍物鏡、聚光鏡等組件，為微粒提供充足的光照并放大成像。光源經(jīng)聚光鏡聚焦后，均勻照亮計數(shù)池中的樣品，使微粒在顯微鏡下清晰可見。高倍物鏡則將微粒放大至合適倍數(shù)，便于后續(xù)觀察與計數(shù)。
 

　　隨后，由電荷耦合器件(CCD)攝像頭捕捉顯微鏡下的圖像，將光學(xué)信號轉(zhuǎn)化為電信號。這一電信號傳輸至圖像處理系統(tǒng)，該系統(tǒng)運(yùn)用數(shù)字圖像算法，對圖像進(jìn)行降噪、增強(qiáng)對比度等預(yù)處理，準(zhǔn)確識別出微粒的輪廓、尺寸等特征。通過設(shè)定合理的粒徑閾值，區(qū)分不同大小的微粒，并依據(jù)預(yù)先校準(zhǔn)的計數(shù)規(guī)則，對符合標(biāo)準(zhǔn)的微粒進(jìn)行逐個計數(shù)，得出樣品中不溶性微粒的數(shù)量及粒徑分布情況。

 

　　顯微計數(shù)法不溶性微粒儀的測定步驟：
 

　　1.準(zhǔn)備工作
 

　　-確保實(shí)驗(yàn)室環(huán)境清潔、無塵，溫濕度相對穩(wěn)定(一般溫度控制在18℃ -26℃，相對濕度在45 -65)，可在超凈室、層流凈化臺或潔凈實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行操作。
 

　　-準(zhǔn)備試劑，如微粒檢查用水需經(jīng)不大于1.0μm的微孔濾膜過濾。
 

　　-清潔玻璃儀器，如平皿等，用凈化水清洗后瀝干備用。
 

　　-準(zhǔn)備合適的微孔濾膜(通常為白色，孔徑0.45μm、直徑25mm或13mm，一面印有間隔3mm的格柵)，確保濾膜符合要求，即膜上10μm以上的不溶性微粒在5粒以下，且不得有25μm以上的微粒。
 

　　-安裝濾器，在凈化工作臺上用凈化水沖洗濾器至潔凈，用無齒鑷子將微孔濾膜安裝到濾器托架上，固定并瀝干水分后，安裝在抽濾瓶上備用。
 

　　2.標(biāo)準(zhǔn)液檢驗(yàn)
 

　　-取50毫升微粒檢查用水或其他溶劑，通過0.45微米孔徑的微孔濾膜過濾，放置在干凈的容器中。
 

　　-旋轉(zhuǎn)容器使其中可能存在的微粒均勻分布，等待氣泡消失后進(jìn)行顯微計數(shù)。如果檢測結(jié)果超過規(guī)定數(shù)值(每50ml中含10μm以上的不溶性微粒應(yīng)在20粒以下，含25μm以上的不溶性微粒應(yīng)在5粒以下)，則需要重新處理水或溶劑直至符合標(biāo)準(zhǔn)。
 

　　3.樣品準(zhǔn)備
 

　　-去除待測樣品的外包裝，并用凈化水清潔容器外壁，然后放置在適當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)環(huán)境中備用。
 

　　-對于標(biāo)示裝量為25ml或25ml以上的靜脈用注射液或注射用濃溶液，將容器外壁洗凈并在凈化臺小心翻轉(zhuǎn)20次使其混合均勻，然后小心開啟容器，抽取25ml樣品；對于小于25ml的樣品，則直接抽取容器中的全部溶液。
 

　　4.樣品處理與測量
 

　　-將抽取的樣品沿濾器內(nèi)壁緩緩注入已準(zhǔn)備好的濾器中，靜置1分鐘，緩緩抽濾至濾膜近干。
 

　　-用同樣方法用微粒檢查用水沖洗濾膜并過濾至近干。
 

　　-將濾膜移至平皿上，干燥后置于顯微鏡下進(jìn)行觀察和計數(shù)。使用雙筒大視野顯微鏡，放大100倍，用經(jīng)標(biāo)定的目鏡測微尺分別測定其長直徑在10μm以上和25μm以上的微粒。
 

　　5.結(jié)果計算
 

　　-根據(jù)濾膜面積上的微粒總數(shù)計算出被檢供試液每1ml(或每個容器)中含不溶性微粒的數(shù)量。